小鼠造模:
選用雌性C57BL/6J小鼠(6–8周齡),通過左側單側股動脈及股靜脈結扎術誘導后肢缺血模型。
氯膦酸鹽脂質體ClodronateLiposomes清除骨骼肌肌肉巨噬細胞清除方案:

通過結扎股動脈/靜脈,對C57BL6/J小鼠的左側脛骨前肌(TA)施加缺血性損傷。為了耗竭單核細胞/巨噬細胞,從手術前2天開始,對小鼠給予荷蘭Liposoma氯膦酸鹽(clodronate)或作為對照的PBS脂質體(Liposoma)處理。
給藥時間線:

巨噬細胞耗竭實驗方案:
氯膦酸鹽脂質體(Clodronate liposomes)及PBS脂質體均購自Liposoma公司。具體給藥方案如下:
•靜脈注射(眼眶后注射):于手術前2天給予70 μL脂質體進行眼眶后靜脈注射;此后,分別于術后第1天及第5天再次給予相同劑量(70 μL)的注射(具體流程見圖S1A)。
•局部肌肉注射(脛骨前肌內注射):于手術前1天,向缺血側脛骨前肌(TA)肌內注射10 μL脂質體;此后,分別于術后第2天及第7天再次進行同樣劑量(10 μL)的局部注射。
清除效果檢測:

圖S1. 氯膦酸鹽清除單核/巨噬細胞并抑制肌肉再生。
(A) 實驗設計方案,展示了在手術誘導缺血及肌肉評估的時間軸上,氯膦酸鹽和PBS(磷酸鹽緩沖液)的處理安排。
(B-D) 術后第9天,通過流式細胞術定量分析脛骨前肌(TA)中CD45?免疫細胞中以下細胞的比例:
-(B) 巨噬細胞(CD11c?/CD11b?/Ly6G?/Ly6C?/F4/80?)
-(C) 單核細胞(CD11c?/CD11b?/Ly6G?/Ly6C?/F4/80?)
-(D) 單核/巨噬細胞(CD11c?/CD11b?/Ly6G?/Ly6C?/F4/80?)
(E) 術后第9天,從缺血后肢分離的脛骨前肌(TA)的重量,分別經PBS-脂質體(對照組,黑色柱)或氯膦酸鹽-脂質體(白色柱)處理。
(F) 脛骨前肌(TA)重量對小鼠體重的標準化比值。
(G) 手術誘導缺血后第9天的小鼠體重。
所有數據均以 均值 ± 標準誤(SEM) 表示,每組 7只小鼠。
論文信息:
論文題目:Functional muscle recovery with nanoparticle-directed M2 macrophage polarization in mice
期刊名稱:PNAS
時間期卷:115 (42) 10648-10653
DOI: 10.1073/pnas.1806908115
產品信息:
貨號:CP-010-010
規格:10ml+10ml
品牌:Liposoma
產地:荷蘭
名稱:Clodronate Liposomes&Control Liposomes
辦事處:靶點科技
Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體清除肌肉巨噬細胞。荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑ClodronateLiposomes見刊于PNAS:通過納米顆粒引導M2型巨噬細胞極化實現小鼠功能性肌肉恢復。

Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸二鈉脂質體清除巨噬細胞的材料和方法:
In vivo macrophage depletion
Macrophage Depletion. Clodronate and PBS liposomes were purchased from Liposoma (SKU: LIP-01). Liposomes (70uL) were administered retro-orbitally 2 days before surgery, and again on days 1 and 5 after surgery (Fig. S1A); 10uL were also administered intramuscularly into the ischemic TA 1 day before surgery, and again on days 2 and 7 after surgery.
巨噬細胞清除材料和方法文獻截圖:

